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以下所述中使用的曲线绘制软件为Curve E xpert1.4, 各位老师们如有需要即可点击此链接下载自行下载使用；

可以采用各种绘图软件来绘制 ELISA 标准曲线，下面以“Curve Expert1.4”软件为例，绘制 ELISA 标准曲线的方法如下；

1．启动“Curve Expert”

2．X 轴输入标准品的 OD 值（双抗夹心输入 OD-空白值），Y 轴输入所对应的浓度值，如图：

3．单击[运行]按钮，出现如下对话框

4．单击[ok]按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框

5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1”开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线。（一般选择第一个多项式拟合）

6. 根据拟合的曲线选取 ELISA 拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：注意：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来进行运算。

在下面的对话框 右上角有“r”值，当“r”值越接近 1 拟合度越好

7．按[Ctrl]键+[L]键，出现如下对话框：

8．输入标准的 OD 值，单击[Calculate]按忸，即可得到待测蛋白的实际含量（标本稀释了 N 倍，运算出的数值应在乘以 N）。 

9. 如想得到 ELISA 拟合曲线的方程，可在步骤 6 的对话框空白处右击，选择”Information”

10. 得到如下对话框：点击“Copy”

在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2) 

Coefficient Data: 

a = -21.531017 

b = 212.05019 

c = -0.24054479 d = 0.018060778 

11. 修改作图中 X,Y 坐标轴高度以及相关属性 选择步骤 9 所示图中的第二排“Graph Properties”，修改好后点击 OK 保存

1、样品的浓度是根据标准曲线计算出来的，所以要严格按照说明书指示进行操作，标准曲线能直接反映操作是否准确。